1994年，本科毕业前夕，周佑君开始接触京昆艺术，并在郑光信、杨沔、王惠玉、马敦元等前辈的指导下学习。随后，她又得到了彭莉佳、辛恩利等声乐界名师的指点，尤其是在高音和气息方面有了更深入的理解。
周佑君不仅对京剧各派唱念艺术有着深刻的认识，对评剧和越剧也有了较深入的研究。她曾主演过多部经典作品，如《祭塔》、《贺后骂殿》、《春秋配》、《生死恨》、《西施》、《杜十娘》，展现了她在京剧表演上的才华。
除了在舞台上活跃，周佑君也积极参与网络文化建设。在2002年起，她担任中国京剧艺术网和宇扬评剧苑等重要戏曲网站论坛版主，并于2003年至2005年期间担任北京音乐教育网论坛民族声乐版版主。这一系列活动帮助她改变了很多人对于戏曲唱法科学性的误解，并为宣传民族传统文化和培养戏曲观众做出了贡献。
此外，周佑君还曾担任网络京剧比赛的评委，与声乐界的人士交流探讨，不断提升自己的专业水平。她的努力使得更多的人认识到 京昆艺术 的魅力，同时也促进了一批新的一代戏曲爱好者出现，他们将传统文化与现代元素结合，为戏曲事业注入新的活力。
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